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芪花降糖方对四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型的影响

   发布时间:2017-12-04   [点击量:371]  


摘 要:目的:研究民族药芪花降糖方对四氧嘧啶小鼠糖尿病模型的影响。方法:小鼠尾静脉注射四氧嘧啶复制糖尿病小鼠模型,以二甲双胍为阳性对照,研究芪花降糖方灌胃给药对糖尿病小鼠血糖的影响。结果:芪花降糖方对糖尿病小鼠有明显降血糖作用,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:芪花降糖方能降低糖尿病小鼠的血糖,值得进一步深入研究。
  关键词:芪花降糖方;糖尿病;血糖

  芪花降糖方是本项目组在对云南民族药进行整理研究工作中,收集到的治疗糖尿病的有效验方,由云南苗族药三七等药物组成,为考察该方对糖尿病的作用,笔者复制了四氧嘧啶糖尿病小鼠动物模型,并用该模型观察了该药的抗糖尿病作用。现将实验结果报告如下。
  1 实验材料
  1.1 动物 健康昆明种小鼠,雄性,体重18~22 g,四川省医学科学研究院动物研究所提供,生产许可证号:SCXK(川)2008-24。生产批号:Dossy2010-7。
  1.2 药品与试剂 芪花降糖方药物煎剂,由云南中医学院民族医药研究中心提供,是由云南产三七等药组成的复方,按常规方法制备供试药,临用前用蒸馏水配成所需浓度;二甲双胍片,北京双鹤药业股份有限公司,090809;四氧嘧啶(Alloxan),Sigma-Aldrich公司,1437801;葡萄糖氧化酶法测定试剂盒,上海荣盛生物技术有限公司,20100501。
  1.3 仪器 UV2250-紫外分光光度计,岛津公司(日本);CF16 RXⅡseries冷冻离心机,HITACHI公司(日本)。
  2 实验方法
  2.1 四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型复制 参照文献[1]选用健康雄性昆明种小鼠,禁食6 h,自由饮水,实验前测定正常小鼠血糖值为7.30~9.99 mmol/L,自尾静脉按70 mg/kg注入四氧嘧啶,复制糖尿病模型。造模后第4 d尾静脉取血,用葡萄糖氧化酶法测定血糖,选用血糖值>11.0 mmol/L的小鼠作为合格的受试糖尿病模型小鼠[2]
  2.2 实验动物的分组与给药[3~4] 受试小鼠在造模4 d后测定的血糖值记为0周,将筛选合格的小鼠,随机分为模型对照组,阳性对照组和芪花降糖方组;分别给予等量蒸馏水、二甲双胍、芪花降糖方药液。各组动物均按0.2mL/10 g体重灌胃(ig)给药,每天定时给药1次,连续给药4周。
  2.3 实验动物血糖测定方法 每周取血前1 h均给药1次,断尾取血10 μL,加入400 μL蛋白沉淀剂中(冰浴中放置),3000 r/min,离心5min(冷冻离心机),取上清液250 μL,按试剂盒说明书采用葡萄糖氧化酶法进行血糖测定。
  2.4 检测指标 (1)体重、进食量和饮水量:实验期间,每天记录小鼠的进食量和饮水量,并观察动物的一般情况;每周测量1次小鼠的体重;(2)血糖:实验期间,每周自小鼠尾静脉取血,用葡萄糖氧化酶法测定血糖水平,连续4周,动态观测动物血糖的变化。
  3 统计学方法
  实验数据均以(Ax-G ±s )表示,采用单因素方差分析法进行数据处理。
  4 实验结果
  芪花降糖方对四氧嘧啶糖尿病小鼠进食量、饮水量、体重和血糖的影响结果分别见表1~表4。
  从上表1、表2和表3中可看出:阳性药物组和芪花降糖方组动物在给药1~4周内进食量和饮水量明显减少(P<0.05);与模型组动物比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在整个实验过程中芪花降糖方对糖尿病小鼠体重无明显影响,与模型组比较(P>0.05)。
  本批实验动物造模前平均血糖值为(8.72±1.12)mmol/L,模型组小鼠于造模后血糖呈升高的趋势。阳性对照药组于第1周血糖开始降低,与模型组比较,第1、3、4周差异有统计学意义(P<0.05)。芪花降糖方在给药1周后血糖开始降低,第2、3、4周与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
  5 讨论
  四氧嘧啶是胰岛β细胞毒剂,通过产生超氧自由基而破坏β细胞,导致胰岛素缺乏,产生类似糖尿病的表现,是筛选糖尿病药物最常用的动物模型[2]。小鼠于造模后72 h后血糖稳定升高,笔者在后96 h取血测定血糖,选用血糖值>11.0 mmol/L的小鼠作为模型小鼠[2]。造模成功的小鼠血糖值与造模型前平均血糖值为(8.72±1.12)mmol/L比较,差异有显著性意义,且均出现明显多饮、多食的表现。
  芪花降糖方是由云南苗族药三七等药物组成的民族药有效验方,可明显降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的血糖,改善多饮、多食的表现,值得进一步深入研究。
  
  参考文献:
  [1]周吉银,周世文.糖尿病大鼠模型研究进展[J].中华中医药学刊,2007,25(3):533~535.
  [2]李仪奎.中药药理实验方法学[M].2版.上海:上海科学技术出版社,2006:603.
  [3]李云巍,牛艳芬,黄年旭,等.黄芩苷对四氧嘧啶致小鼠糖尿病降糖作用的研究[J],昆明医学院学报,2009,(6):5~8.
  [4]赵贵卿,袁丽珍,李元敏,等.二苯乙烯类化合物E1对2型糖尿病小鼠血清游离脂肪酸组成的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,2002,16(4):287~291.

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