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碎米果镇痛抗炎的实验研究

   发布时间:2017-12-28   [点击量:514]  


摘 要:目的:观察碎米果水煎液的镇痛、抗炎作用。方法:镇痛实验采用小鼠热板法、光热刺激法、醋酸致痛扭体法等实验方法;抗炎实验采用二甲苯所致小鼠耳肿胀方法及二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性增高的方法。结果:碎米果水煎液对小鼠热刺激致痛、光热刺激致痛及注入醋酸致痛均有抑制作用,还能降低二甲苯所致小鼠耳肿胀度及皮肤毛细血管通透性。结论:碎米果水煎液有一定镇痛、抗炎作用。
  关键词:碎米果;镇痛;抗炎;实验研究
  碎米果又名牙痛草、碎米棵、大红袍、小铁子,为紫金牛科植物小铁仔(Myrsine africana L.)的全株。生于海拔1100~3600 m的山间、林下、路边、山坡、灌木丛中。全年可采挖,洗净切片晒干[1]。本品甘、淡,凉[2]。具有祛风止痛、清热利湿、收敛止血的功效。主治风湿疼痛、牙痛、泄泻、痢疾、血崩、便血、肺结核咳血等[3]。《贵州民间药物》记载:“驱风湿,活血,治痢疾。”《云南中草药》记载:消炎,止痛,止痢。治牙痛,肠炎,痢疾。内服:煎汤,0.3~1两,炖肉或浸酒。治痢疾:大红袍、仙鹤草根各一两,煎水服。治风湿:大红袍五钱,大风藤、追风散各三钱,红禾麻二钱,泡酒一斤。日服二次,每次五钱至一两。治红淋:大红袍三至五钱。煎水服。(选方出《贵州民间药物》)。闭经:大红袍1~2两,红糖适量,水煎分3次服。痛经:大红袍、丹参、香附各3钱,小茴香根1钱,水煎服。外用治黄水疮,烧烫伤,鲜根烤出汁搽患处。经文献查阅,对碎米果的现代研究较少。根据其功效和主治,拟进行碎米果水煎液镇痛、抗炎方面的初步研究,为其临床应用提供药效学依据。
  1 实验材料
  1.1 实验动物 昆明种小白鼠,体重18~22 g,雌雄兼有,由四川省医学科学院实验动物研究所提供,生产许可证号:SCXK(川)2004-16。
  1.2 药物 碎米果采自昆明小墨雨一带山上,由云南中医学院钱子刚教授鉴定。碎米果药材先浸泡30 min,再煎煮3次,每次30 min,过滤合并3次药液,水浴浓缩至2 g生药/ mL的药液。元胡止痛片(广西半宇天龙制药有限公司,产品批号060801);阿司匹林(昆明云健制药有限公司,生产批号20051195)。各药给药剂量均按临床等效剂量换算。
  1.3 试剂及主要仪器
  1.3.1 试剂 所用试剂按实验要求均为市售化学纯或分析纯试剂。
  1.3.2 主要仪器 RB-200智能热板仪(成都泰盟科技有限公司);SW-200光热尾痛测试仪(成都泰盟科技有限公司);756型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)。
  1.4 统计学方法 实验数据以(Ax-G ±s )表示,计量资料用方差分析,非计量资料用非参数检验。
  2 方法
  2.1 镇痛实验
  2.1.1 热板法[4] 取18~22 g雌性小鼠,将热板测痛仪预热至55 ℃,测定小鼠的痛阈值(即痛反应潜伏期,指小鼠接触热板至舔后足的时间)。痛反应在5~30 s内为合格鼠,取2次正常痛阈平均值,作为该鼠给药前痛阈值。将合格小鼠随机分为4组,分组及给药剂量如表1所示,连续灌胃6 d,于末次给药后30、60、90、120、180min分别测量小鼠痛阈值,以60 s为限,以免烫伤小鼠。
  2.1.2 甩尾法[4] 取18~22 g小鼠56只,雌雄各半,将小鼠置鼠筒中,尾自然下垂于筒外,以启动光热至鼠尾急速摆动的时间为鼠尾潜伏期痛阈值,调整刺激强度使基础痛阈值(给药前痛阈值)为5 s左右,记录其给药前痛阈值,按表2所示分组及给药,小鼠连续灌胃7 d,于末次给药后30 min测其痛阈,照射时间以10 s为限,以免烫伤小鼠。记录各组动物给药后痛阈值,并与给药前作比较。
  2.1.3 扭体法[4] 选用体重18~22 g的小鼠56只,按表3所示分组及给药,连续灌胃6 d后,于末次给药后1 h,每鼠腹腔注射0.5%冰醋酸0.2 mL/只,记录注射醋酸后15 min内各鼠扭体出现的时间和扭体次数。
  2.2 抗炎实验
  2.2.1 对二甲苯所致小鼠耳肿胀及免疫器官重量的影响[4] 取18~22 g小鼠,随机分为4组,每组14只,给药剂量如表4所示。连续灌胃7 d,于末次给药后30 min,各小鼠右耳涂二甲苯30 μL,1 h后将小鼠颈椎脱臼处死,剪下左右耳廓,用打孔器打下直径7 mm的耳片,称重,计算肿胀率;将取耳后的小鼠迅速打开胸腔、腹腔,取出胸腺、脾脏,用电子天平称其鲜重并计算胸腺指数和脾脏指数。
  肿胀率=右耳重-左耳重左耳重×100%胸腺(脾脏)指数=胸腺(脾脏)重量/g体重/g×10
  2.2.2 对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性的影响[4] 取18~22 g小鼠56只,随机分为4组,分组及给药剂量如表5所示。连续灌胃7 d,于第6 d将小鼠腹部正中位去毛,第7 d末次给药后60 min,各小鼠尾静脉注射0.5%伊文思兰生理盐水溶液0.2 mL/只,随即于小鼠腹部去毛皮肤上滴二甲苯30 μL/只,30 min后小鼠颈椎脱臼处死,剥下染蓝腹部皮肤,用打孔器打下两块直径7㎜的染蓝皮肤,放入有塞玻璃试管内。在每个试管内加入丙酮:生理盐水=7:3的混合溶液5 mL,置37 ℃的恒温箱中孵化36 h。2000 r/min离心10 min,取上清液,于610 nm处比色测定吸光度,以空白丙酮生理盐水校零。
  3 实验结果
  3.1 镇痛实验
  3.1.1 热板法对小鼠热刺激致痛的影响 见表1。
  结果表明:与空白对照组比较,高剂量组在90 min和120 min时能提高小鼠热刺激致痛反应的痛域值,差异有非常显著性意义(P<0.01);低剂量仅在90 min提高小鼠热刺激致痛反应的痛域值,差异有非常显著性意义(P<0.01),但2组均不如元胡止痛对照组。
  3.1.2 甩尾法对小鼠光热刺激致痛的影响 见表2。
  结果表明:与空白对照组比较,各给药组均能提高小鼠光热刺激致痛反应痛域值,差异有非常显著性意义(P<0.01)。
  3.1.3 扭体法对小鼠醋酸致痛的影响 见表3。
  结果表明:与空白对照组比较,元胡止痛组与碎米果水煎液高剂量组均能减少醋酸所致小鼠扭体次数,并延长扭体反应出现时间,差异有非常显著性意义(P<0.01);低剂量组能减少小鼠扭体次数,差异有显著性意义(P<0.05)。
  3.2 抗炎实验
  3.2.1 对二甲苯所致小鼠耳肿胀及免疫器官重量的影响 见表4。
  结果表明:与空白对照组比较,各给药组均能降低二甲苯所致小鼠耳廓肿胀率和脾脏指数,差异有非常显著性意义(P<0.01)。对胸腺指数有下降趋势,但无显著性差异。
  3.2.2 对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性的影响 见表5。
  结果表明:与空白对照组比较,各给药组均能降低小鼠皮肤毛细血管通透性,差异有非常显著性意义(P<0.01)。
  4 讨论
  碎米果主产于云南、四川、贵州等省,具有祛风止痛、清热利湿、收敛止血的功效,主治风湿疼痛、牙痛、泄泻、痢疾、血崩、便血、肺结核咳血等症。本实验对其进行了抗炎、镇痛实验,实验结果表明,碎米果能提高小鼠热刺激致痛反应及小鼠光热刺激致痛反应的痛域值,并减少醋酸所致小鼠扭体反应的扭体次数;对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用,降低小鼠皮肤毛细血管通透性。说明碎米果有较好的镇痛、抗炎作用,为其临床应用提供了理论依据。
  
  参考文献:
  [1]詹文涛.临床常用中草药[M].昆明:云南科技出版社,1996:88~89.
  [2]黄泰康.中药辞海[M].北京:中国医药科技出版社,1993:281~282.
  [3]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海:上海科技出版社,1999:82~83.
  [4]陈奇.中药药理学实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,1993:362~377.

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