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基质金属蛋白酶—7在非小细胞肺癌中表达的意义

   发布时间:2018-01-16   [点击量:506]  


摘要:目的谈论基质金属蛋白酶-7(MMP-7)在非小细胞肺癌的发生、润泽及转移进程中的作用。方法选用免疫组织化学SP法,检测原发性非小细胞肺癌白腊包埋组织80例、正常肺组织40例中MMP-7的表达水平,分析其与非小细胞肺癌的病理分化程度、手术—病理分期、淋巴结转移的相关性。作用 非小细胞肺癌组MMP—7阳性率高于正常肺组织组(P=0.000)。非小细胞肺癌组TNM分期中Ⅰ、Ⅱ期吞并后和Ⅲ、Ⅳ期吞并后MMP—7的阳性率比较,差异有核算学意义(P=0.022);低分化癌的MMP—7的阳性率与高、中分化癌比较,差异无核算学意义(P=0.073);淋巴结转移组MMP—7的表达与无淋巴结转移组差异有核算学意义(P=0.003)。结论 MMP-7可能参加了非小细胞肺癌的发生和演进的进程;MMP—7检测可能成为判别非小细胞肺癌发生展开和点评预后的有用参看方针之一,关于非小细胞肺癌的前期猜想可能具有重要的临床意义。


关键词:非小细胞肺癌;基质金属蛋白酶—7;免疫组织化学


  肺癌为其时国际病死率最高的恶性肿瘤,其间非小细胞肺癌所占比例高达85%。基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase 7,MMP-7)归于基质金属蛋白酶(MMP)基因家族的成员之一,具有健壮的基质降解活性和广泛的底物特异性。本文运用免疫组织化学(免疫组化)SP法对非小细胞肺癌白腊包埋组织标本中的MMP—7进行检测,查询其在病变组织中的表达,分析其表达的意义,为非小细胞肺癌的展开及预后判别供应一种新的参看方针。
  
  1 材料与方法
  
  1.1 标本收集 收集泰安中心医院2005—2009年经病理确诊为非小细胞肺癌的白腊包埋存档组织块80例,其间男性52例,女性28例。年岁35~82岁,均匀年岁59,72岁。组织学分类:鳞状细胞癌51例,腺癌29例,其间高分化18例,中分化30例,低分化32例。80例中无淋巴结转移的33例,有淋巴结转移的47例;根据2002年国际抗癌联盟TNM分期:Ⅰ期26例,Ⅱ期15例,Ⅲ期25例,Ⅳ期14例。全部患者术前均未经放疗及化疗。癌旁正常肺组织标本40例。
  1.2 方法每一病例蜡块连续切片2张,厚5μm。其间1张切片用于HE染色,进行组织形态学查询,1张切片用于免疫组化SP法MMP—7染色,以检测MMP—7蛋白在组织中的表达。
  1.3 作用判定标准MMP一7免疫反应的阳性产品首要定位于胞浆,部分定位于胞膜。阳性物质呈黄色颗粒状,染色强时可呈棕褐色。选用Greens—pan半定量法对细胞染色强度及阳性细胞的百分率进行评分。(1)根据每张切片中细胞染色强度进行评分:细胞内无染色为0分,浅黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分。(2)按组织切片中的阳性染色细胞数占全部肿瘤细胞百分比记分(随机取10个高倍镜视界的均匀数):阳性上色细胞占计数细胞百分率为0者,记0分,<10%为1分,10%~50%为2分,>50%为3分。(3)按上述二项方针的分数乘积凹凸分为:o分为阴性(一),1~2分为弱阳性(+),3~4分为中度阳性(++)大于4分为强阳性(+++)。
  1.4 核算学方法选用SPSS 15.0核算软件包进行核算学分析。MMP—7蛋白阳性率的分析比较选用卡方查验和Fisher’s精确概率查验,以P<0.05为差异有核算学意义。
  
  2 作用
  
  MMP-7免疫组化染色作用见表1、表2。MMP—7蛋白阳性率在正常肺组织组和非小细胞肺癌组中呈升高趋势,阳性率分别为12.5%、70.0%,在两组之间比较,差异有核算学意义(y2=35.276,P=0.000)。MMP—7阳性表达在鳞状细胞癌38例(38/51),在腺癌18例(18/29),两者之间比较,差异无核算学意义(X2=1.363,P—0.243);MMP7阳性表达在高中分化非小细胞肺癌27例(30/48),低分化26例(26/32),两者之间比较,差异无核算学意义(y2=3.214,P=0.073);MMP—7阳性表达有淋巴结转移的非小细胞肺癌39例(39/47),无淋巴结转移的17例(17/33),两者之间比较,差异有核算学意义(y2=9.139,P=0.003);MMP—7阳性表达在Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌24例(24/41),Ⅲ、Ⅳ期32例(32/39),两者之间比较,差异有核算学意义(y2=5.262,P=0.022)。
  
  3 谈论
  
  恶性肿瘤的演进、润泽及转移是一个极为凌乱的进程,迄今为止,医学领域关于肿瘤的研讨现已进入到了分子基因水平。肺癌为其时国际各地最常见的恶性肿瘤之一。在我国,肺癌发病在城市中居恶性肿瘤的首位,在农村居第三位,且近年来有增高趋势,20年间的死亡率上升了1倍多。
  MMP-7归于MMP基因家族的成员之一,其分子量最小,为28kD。各种MMP家族成员分子结构中一般都保留了四个特征区域,MMP-7只具有前三个区域,短少c结束的血红素结合蛋白的同源区域。c结束区域为基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metallproteinases,TIMP)与MMP彼此作用的区域,由于短少C结束,受TIMP的负调理作用较小,因此MMP—7具有健壮的基质降解活性和广泛的底物特异性,其间包括纤维结合素、蛋白多糖、Ⅳ型胶原、层粘蛋白、Ⅰ型明胶和可溶性弹性蛋白等底物。各种MMP在癌组织中表达时不在肿瘤细胞中,都位于基质细胞中。而MMP—7却表达于肿瘤细胞中,在基质细胞中并不表达。一同,MMP—7不仅在肿瘤细胞内表达,并且在肿瘤细胞邻近的血管内皮细胞中也有所表达。MMP—7的表达被看作是一种肿瘤诱导的宿主反应,除了可促进肿瘤细胞的润泽和转移外,还能够促进原发和继发肿瘤的发生展开。Sasaki等选用RT—PCR方法研讨73例肺癌组织及癌旁正常肺组织MMP—7mRNA的表达,作用肺癌组织中MMP—7mRNA水平升高(P<0.01),并证明了肺癌MMP—7mRNA水平与预后无关。Kawano等用免疫组化法研讨肺癌的MMP—7的表达,标明MMP—7在腺癌的表达率高于小细胞肺癌,MMP—7与肺癌的分化程度无关。王志新等用rMMP—7和脂质体转染MMP—7的反义寡核苷酸(UPO—MAON)作用于肺腺癌细胞(A549),检测发现:MMP—7能够促进肺癌细胞株A549的增殖。
  本实验作用闪现,MMP—7在正常肺组织、非小细胞肺癌组织中均存在不同程度的表达,且阳性率均呈上升趋势。正常肺组织、非小细胞肺癌组织的表达差异有核算学意义。这与梅同华等、Sasa—ki等的作用一起。在非小细胞肺癌中,MMP—7的阳性率与肿瘤分化程度无关,这与Kawano等的作用一起。MMP—7的阳性率与TNM分期及淋巴结的转移均有相关性。这与国内外关于肺癌的研讨作用不甚相同,但本研讨与MMP—7在食管癌侵袭转移中研讨作用一起。这些现象说明,MMP—7在非小细胞肺癌发生展开进程中可能起到了非常重要的作用,当支气管粘膜恶变时,恶变的组织分泌MMP—7增加,损坏了部分的组织结构,降解了基底膜,然后促进肿瘤的生长。跟着非小细胞肺癌临床分期的增加、组织分化程度的下降和淋巴结的转移,MMP—7的表达明显增强,说明MMP—7在非小细胞肺癌的转移进程中也起到了重要作用,MMP—7能够降解肿瘤细胞润泽和向淋巴结锚定进程中有必要通过的含有胶原的屏障,这可能是其促进非小细胞肺癌细胞不断润泽和发生淋巴转移的机制之一。


  总之,MMP—7蛋白可能与非小细胞肺癌发生展开的进程密切相关,其阳性表达可能反映了非小细胞肺癌细胞的增殖活性,并能估计非小细胞肺癌发生润泽和转移的潜能。

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